Analýza viru psí parainfluenzy (PCR), č. AN317НОС pro domácí mazlíčky, kočky a psy v Moskvě

Respirační virové infekce psů se často vyskytují v přeplněných podmínkách, kde je velké množství psů umístěno ve vnitřních prostředích, jako jsou útulky a boudy. Čím déle jsou psi v takových podmínkách drženi, tím vyšší je pravděpodobnost rozvoje respirační infekce. V chovatelských stanicích může infekční respirační onemocnění psů (také nazývané psí respirační infekční komplex (CRIS), dříve nazývané „kašel z psí boudy“ nebo „infekční tracheobronchitida psů“ způsobit značné náklady spojené s léčbou a karanténou zvířat. Toto onemocnění se může vyvinout u psů patřící soukromým majitelům, v kontaktu s jinými psy na procházkách, výstavách nebo výcvikových kurzech, stejně jako ve veterinárních nemocnicích.

1. Příprava pacienta
2. Indikace a kontraindikace
3. Interpretace a forma výstupu výsledku

Díky širokému využití molekulárních diagnostických metod v klinické praxi bylo zjištěno, že počet virů způsobujících infekce dýchacích cest u psů je mnohem vyšší, než se dosud předpokládalo. Souběžné infekce způsobené více viry a také bakteriemi, jako jsou Mycoplasma spp., Bordetella bronchiseptica a Streptococcus equi zooepidemicus, jsou běžné a vyznačují se závažnějším průběhem.

Virus psí parainfluenzy (CPIV) je celosvětově jedním z nejběžnějších patogenů způsobujících CRIS u psů. Tento obalený virus, patřící do čeledi Paramyxoviridae, je jednovláknová RNA. Na rozdíl od viru psinky obsahuje vnější obal viru parainfluenzy nejen hemaglutinin, ale také neuraminidázu. Riziko infekce u psů přímo souvisí s hustotou psí populace. V experimentálních infekčních studiích bylo prokázáno, že replikace CPIV probíhá primárně ve sliznici nosní dutiny, hltanu, průdušnice a průdušek a způsobuje poškození respiračního epitelu. Virémie je vzácná, ale CPIV lze detekovat ve slezině, játrech a ledvinách psů s koinfekcí. Vylučování viru je pozorováno pouze po dobu 8-10 dnů po infekci, přičemž aerosolizované respirační sekrety umožňují přenos viru na vnímavé psy. Infekce psí parainfluenzou je charakterizována kašlem, někdy doprovázeným vysokým zvukem „trubky“, zřejmě způsobeným otokem hlasivek. U laryngitidy a tracheitidy může být pozorováno zvracení a vykašlávání sputa. Někdy je pozorován silný výtok z nosu, tonzilitida a faryngitida. Při absenci sekundárních infekcí klinické příznaky vymizí během 6-14 dnů. V případě současné infekce B. bronchiseptica nebo jiné respirační virové infekce, zejména u štěňat, však může být onemocnění závažné a dlouhodobé.

Klinický obraz nám neumožňuje zjistit příčinu infekčního respiračního onemocnění, protože různé patogeny mohou způsobit podobné příznaky. Diagnostiku komplikuje i častý výskyt koinfekcí. Kromě toho mohou neinfekční etiologické faktory způsobit rozvoj klinického obrazu připomínajícího infekční respirační onemocnění. Většina psů zažívá spontánní zotavení. Trvá-li onemocnění déle než 7-10 dní nebo při přítomnosti bakteriální pneumonie, doprovázené letargií a nechutenstvím, je nutná etiologická diagnóza. V případě propuknutí v chovatelské stanici se pro zlepšení přesnosti diagnózy a také pro lepší interpretaci klinického významu výsledků testů doporučuje získat více typů vzorků od několika psů, kteří vykazují nebo nevykazují klinické příznaky. V časných stádiích onemocnění (během prvních 1-3 dnů) nebo u infikovaných psů před objevením se klinických příznaků jsou nejúčinnější detekční metody, jako je PCR. Kombinované použití různých metod detekce patogenů a metod sérologického výzkumu může zlepšit přesnost diagnózy. Postmortální vyšetření poskytuje cenné diagnostické informace a mělo by být provedeno v případech úmrtí nebo po eutanazii. Získané vzorky tkání jsou odeslány k histopatologickému vyšetření (po fixaci ve formalínu), bakteriologické a virologické kultivaci (vzorky čerstvé tkáně) a PCR testování k detekci virů a bakterií způsobujících onemocnění dýchacích cest (vzorky čerstvé nebo zmrazené tkáně).

Vzhledem k tomu, že komplex respiračních infekcí u psů je polyetiologická patologie, jsou prováděné studie obvykle zaměřeny na identifikaci řady patogenů, včetně detekce viru parainfluenzy (virus C.parainfluenzs) pomocí metody PCR. PCR testovací systémy, které se v takových případech používají navíc, mohou detekovat různé respirační patogeny, jako je respirační adenovirus, respirační koronavirus, virus chřipky psů, stejně jako bakteriální patogeny, jako jsou B. bronchiseptica a Mycoplasma spp. V tomto případě se používají výtěry z nosní dutiny a/nebo kaudální části hltanu, případně výplachy.

Testovaný analyt: epitel nosní sliznice.

Metoda výzkumu: PCR v reálném čase.

Příprava pacienta: biomateriál je vybrán před použitím lokálních a systémových léků; pokud se objeví hnisavý výtok, musí být nejprve odstraněn pomocí čisté gázy navlhčené 0,9% fyziologickým roztokem (NaCl).

indikace: kýchání, kašel, výtok z nosu, vyšetření zvířat před výstavami, před krytím a před prodejem, vyšetření před očkováním Nobivac KS (Nobivac KS) – živá suchá vakcína proti bordetelóze a parainfluenze u psů.

Kontraindikace: neznámý.

Způsob výběru biomateriálu: seškrabání epiteliálních buněk nosní sliznice pomocí urogenitální sondy.

Předanalýza:

1. Opatrně zaveďte urogenitální sondu do nosního průchodu do hloubky 0,1-0,3 cm a rotačními pohyby odeberte buněčný materiál ze sliznice nosní dutiny.
2. Přeneste sondu do mikrozkumavky s transportním médiem, rotačními pohyby „vsuňte“ biomateriál do kapaliny a sondu zlikvidujte.
3. Mikrozkumavku pevně uzavřete víčkem, dokud nezaklapne.
4. Podepište zkumavku a vyplňte všechna pole ve formuláři doporučení!
5. Vzorek lze skladovat po dobu 10 dnů při +2℃. +8 ℃.
6. Teplotní podmínky pro transport do laboratoře +2 ℃. +8℃ (modré balení) .

Interpretace výsledku:

Výsledky studie obsahují informace pouze pro lékaře. Diagnóza se provádí na základě komplexního posouzení různých ukazatelů, dalších informací a závisí na diagnostických metodách.

Formulář výsledku: kvalitativní metoda. Detekce nebo nedetekce RNA viru parainfluenzy (CPiV) v testovaném vzorku.

Seznam zdrojů:

1. S. Vaden, D. Knoll, F. Smith, L. Tilley. Kompletní průvodce laboratorními a instrumentálními studiemi psů a koček.
2. Infekční nemoci psů a koček, čtvrté vydání ISBN: 978-1-4160-6130-4 Copyright © 2012, 2006, 1998, 1990 Saunders, otisk Elsevier Inc.